
El objetivo de la presente investigación fue optimizar un medio de cultivo para conservación in vitro y el establecimiento de un banco de germoplasma de una orquídea utilizando un inhibidor (Manitol) con la finalidad de comparar tres medios de cultivo y evaluar diferentes paramentos fisiológicos y validar un protocolo integral de cultivo in vitro para Phragmipedium kovachii, El desarrollo del ensayo se desarrolló en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de San Martín (UNSM), asegurando la conservación del germoplasma. Se optimizaron medios de cultivo y condiciones de crecimiento para mejorar la supervivencia, el desarrollo de explantes y el establecimiento de plántulas in vitro, contribuyendo a la creación de un banco de germoplasma. Se utilizó un DCA de 3 x 4, con 12 tratamientos por 10 repeticiones por tratamiento, donde se evaluaron diferentes medios de cultivo y la adición de manitol como inhibidor de crecimiento. El análisis estadístico reveló que el medio M&S fue el más adaptable, mostrando 0,94 cm de altura, 20 hojas en promedio, 1,78 cm de longitud de hojas, 1,38 tallos, 1,12 raíces y 0,86 cm de longitud de raíces por plántula. Hubo variaciones significativas en el crecimiento de las plántulas según el medio de cultivo y la concentración de manitol. El uso de manitol afectó el desarrollo vegetativo, con resultados diversos en los parámetros de crecimiento a lo largo del estudio. Este enfoque puede mejorar la conservación y cultivo de Phragmipedium kovachii, una contribución importante para su preservación y estudio futuro.